Bahnbrechend TB- an DR-TB-Diagnosléisung vum #Macro & Micro-Test!

Eng nei Waff fir d'Diagnos vun Tuberkulos an d'Detektioun vu Medikamentenresistenz: Eng nei Generatioun vun Targeted Sequencing (tNGS) a Kombinatioun mat Maschinnléieren fir d'Diagnos vun Tuberkulos-Hypersensibilitéit

Literaturbericht: CCa: en diagnostescht Modell baséiert op tNGS a maschinellem Léieren, dat fir Leit mat manner bakterieller Tuberkulos a tuberkulöser Meningitis gëeegent ass.

Titel vun der Thees: Tuberkulos-gezielte Sequenzéierung vun der nächster Generatioun a maschinellt Léieren: eng ultrasensitiv Diagnosestrategie fir paucifiz Lungentubulären a tubulär Meningitis.

Zeitschrift: 《Clinica Chimica Acta》

WANN:6.5

Datum vun der Verëffentlechung: Januar 2024

Zesumme mat der University of Chinese Academy of Sciences an dem Beijing Chest Hospital vun der Capital Medical University huet Macro & Micro-Test en Tuberkulosdiagnosmodell entwéckelt, deen op der neier Generatioun vun der Targeted Sequenceing (tNGS) Technologie an der maschineller Léiermethod baséiert, déi eng ultra-héich Detektiounsempfindlechkeet fir Tuberkulos mat wéineg Bakterien an tuberkulöser Meningitis geliwwert huet, eng nei Hypersensibilitéitsdiagnosmethod fir d'klinesch Diagnos vun zwou Aarte vun Tuberkulos geliwwert huet, an déi präzis Diagnos, d'Detektioun vun der Medikamentenresistenz an d'Behandlung vun Tuberkulos gehollef huet. Gläichzäiteg gouf festgestallt, datt d'Plasma-cfDNA vum Patient als e passenden Prouftyp fir d'klinesch Proufnahme bei der Diagnos vun TBM benotzt ka ginn.

An dëser Studie goufen 227 Plasmaprouwen a Gehirnflëssegkeetsprouwen benotzt fir zwou klinesch Kohorten opzestellen, an deenen d'Laboratoire-Diagnos-Kohortprouwen benotzt goufen fir de maschinelle Léiermodell vun der Tuberkulosdiagnos ze etabléieren, an d'klinesch-diagnostesch Kohortprouwen benotzt goufen fir den etabléierte Diagnosemodell ze verifizéieren. All Prouwen goufen als éischt vun engem speziell entwéckelten, gezielte Capture-Probe-Pool fir Mycobacterium tuberculosis gezielt gezielt getest. Duerno, baséiert op TB-tNGS-Sequenzéierungsdaten, gëtt den Entscheedungsbammodell benotzt fir eng 5-fach Kräizvalidéierung op den Trainings- a Validéierungssets vun der Laboratoire-Diagnos-Warteschlaang duerchzeféieren, an d'Diagnoseschwellen vu Plasmaprouwen a Gehirnflëssegkeetsprouwen ginn kritt. De krittene Schwellwäert gëtt an zwou Testsets vun der klinescher Diagnos-Warteschlaang fir d'Detektioun zesummebruecht, an d'Diagnoseleeschtung vum Léierer gëtt mat der ROC-Kurve evaluéiert. Schlussendlech gouf den Diagnosemodell vun Tuberkulos kritt.

Fig. 1 schematescht Diagramm vum Fuerschungsdesign

Resultater: Geméiss de spezifesche Schwellenwäerter vun der CSF-DNA-Prouf (AUC = 0,974) a Plasma-cfDNA-Prouf (AUC = 0,908), déi an dëser Studie bestëmmt goufen, louch d'Sensibilitéit vun der CSF-Prouf bei 227 Proben bei 97,01%, d'Spezifizitéit bei 95,65% an d'Sensibilitéit an d'Spezifizitéit vun der Plasma-Prouf bei 82,61% an 86,36%. An der Analyse vu 44 gepaarte Proben aus Plasma-cfDNA an Zerebrospinalflëssegkeet-DNA vu Patienten mat TBM huet d'Diagnosestrategie vun dëser Studie eng héich Konsistenz vun 90,91% (40/44) a Plasma-cfDNA an Zerebrospinalflëssegkeet-DNA gewisen, an d'Sensibilitéit bei 95,45% (42/44). Bei Kanner mat pulmonaler Tuberkulos ass d'Diagnosestrategie vun dëser Studie méi sensibel fir Plasma-Prouwen wéi d'Xpert-Detektiounsresultater vu Magensaft-Prouwen vun de selwechte Patienten (28,57% VS 15,38%).

Fig. 2 Analyseleistung vum Tuberkulosdiagnosmodell fir Populatiounsstichproben

Abb. 3 Diagnoseresultater vu gepaarte Proben

Conclusioun: An dëser Studie gouf eng iwwerempfindlech Diagnosemethod fir Tuberkulos etabléiert, déi en Diagnosinstrument mat der héchster Detektiounsempfindlechkeet fir klinesch Patienten mat oligobazillärer Tuberkulos (negativ Kultur) ka bidden. D'Detektioun vun iwwerempfindlecher Tuberkulos op Basis vu Plasma-cfDNA kéint e passenden Prouftyp fir d'Diagnos vun aktiver Tuberkulos an tuberkulöser Meningitis sinn (Plasmaproben si méi einfach ze sammelen wéi Gehirnflëssegkeet fir Patienten, bei deenen de Verdacht op Gehirtuberkulos besteet).

Originallink: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? via%3Dihub

Kuerz Aféierung vun de Macro & Micro-Test Tuberkulos-Detektiounsprodukter aus der Serie

Wéinst der komplizéierter Proufsituatioun vu Tuberkulospatienten a senge verschiddene Bedierfnesser bitt Macro & Micro-Test e komplette Set vun NGS-Léisunge fir d'Verflëssegungsextraktioun aus Sputumprouwen, d'Opbau a Sequenzéierung vun enger Qualcomm-Bibliothéik, an d'Datenanalyse. D'Produkter decken d'Schnelldiagnos vun Tuberkulospatienten, d'Detektioun vun der Medikamentenresistenz vun Tuberkulos, d'Typiséierung vu Mycobacterium tuberculosis an NTM, d'Diagnos vun Iwwerempfindlechkeet bei bakterienegativen Tuberkulos- a tuberkuléise Leit, etc.

Serien-Detektiounskits fir Tuberkulos a Mykobakterien:

Artikel Nr. Produktnumm Inhalt vun engem Produkttest Prouftyp uwendbar Modell
HWTS-3012 Prouf-Fräisetzungsmëttel Benotzt bei der Verflësseging vu Sputumprouwen, huet eng éischtklasseg Rekordnummer, Sutong Machinery Equipment 20230047, kritt. Schleim
HWTS-NGS-P00021 Qualcomm Quantitéitsdetektiounskit fir iwwerempfindlech Tuberkulos (Sond-Erfassungsmethod) Net-invasiv (flësseg Biopsie) Iwwerempfindlechkeetsdetektioun fir bakterienegativ pulmonal Tuberkulos a Gehirknäppchen; D'Prouwe vu Leit, déi verdächtegt goufen, mat Tuberkulos- oder Net-Tuberkulos-Mykobakterien infizéiert ze sinn, goufen duerch High-Déift-Sequenzéierungsmetagenomik analyséiert, an d'Detektiounsinformatioun, ob Tuberkulos- oder Net-Tuberkulos-Mykobakterien infizéiert waren, an déi wichtegst Informatioune iwwer d'Medikamentresistenz vun der éischter Linn vu Mycobacterium tuberculosis goufen zur Verfügung gestallt. Periphere Blutt, Alveolarspülflëssegkeet, Hydrothorax an Aszites, Fokuspunktiounsprobe, Zerebrospinalflëssegkeet. Zweet Generatioun
HWTS-NGS-T001 Mycobacterium-Typing- a Medikamentenresistenzdetektiounskit (Multiplex-Amplifikatiounssequenzéierungsmethod) Mycobacterium-Typtest, inklusiv MTBC an 187 NTMD'Detektioun vun der Medikamentenresistenz vu Mycobacterium tuberculosis deckt 13 Medikamenter a 16 Kärmutatiounsplaze vu Medikamentenresistenzgenen of. Sputum, Alveolarspülflëssegkeet, Hydrothorax an Aszites, Fokuspunktiounsprobe, Zerebrospinalflëssegkeet. Duebelplattform vun der zweeter/drëtter Generatioun

Highlights: HWTS-NGS-T001 Mycobacterium-Typing- a Medikamentenresistenzdetektiounskit (Multiplex-Amplifikatiounsmethod)

Produktvirstellung

D'Produkt baséiert op den Haaptmedikamenter vun der éischter an zweeter Linn, déi an de Richtlinne vun der WHO TB-Behandlung beschriwwe sinn, Makroliden an Aminoglykosiden, déi allgemeng an den NTM-Behandlungsrichtlinne benotzt ginn, an d'Plazen fir d'Medikamentresistenz decken all eng Grupp vu Plazen of, déi mat der Medikamentresistenz verbonne sinn, am WHO Mycobacterium tuberculosis-Komplex-Mutatiounskatalog, souwéi aner gemellt Medikamentresistenzgenen a Mutatiounsplazen, laut den Ënnersichungen a Statistike vun héich bewäerter Literatur am In- an Ausland.

D'Typiséierung baséiert op den NTM-Stämm, déi an den NTM-Richtlinne vum Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases zesummegefaasst sinn, an dem Konsens vun Experten. Déi entwéckelt Typiséierungsprimer kënnen méi wéi 190 NTM-Aarten amplifizéieren, sequenzéieren an annotéieren.

Duerch gezielte Multiplex-PCR-Amplifikatiounstechnologie goufen d'Genotypiséierungsgenen an d'Medikamentresistente Genen vu Mycobacterium duerch Multiplex-PCR amplifizéiert, an d'Amplikon-Kombinatioun vun den ze detektéierenden Zilgenen gouf kritt. Déi amplifizéiert Produkter kënnen an High-Throughput-Sequenzéierungsbibliothéike vun der zweeter oder drëtter Generatioun konstruéiert ginn, an all Sequenzéierungsplattforme vun der zweeter an drëtter Generatioun kënnen enger Déiftsequenzéierung ënnerworf ginn, fir d'Sequenzinformatioun vun den Zilgenen ze kréien. Duerch de Verglach mat de bekannte Mutatiounen, déi an der agebauter Referenzdatenbank enthale sinn (inklusiv dem WHO Mycobacterium tuberculosis Complex Mutatiounskatalog a senger Bezéiung mat Medikamentenresistenz), goufen d'Mutatiounen am Zesummenhang mat Medikamentenresistenz oder Empfindlechkeet vun Anti-Tuberkulos-Medikamenter bestëmmt. Kombinéiert mat der selbstopgemaachter Sputum-Probebehandlungsléisung vu Macro & Micro-Test gouf de Problem vun der gerénger Nukleinsäure-Amplifikatiounseffizienz vu klineschen Sputum-Prouwen (zéngmol méi héich wéi déi vun traditionelle Methoden) geléist, sou datt d'Detektioun vun der Medikamentenresistenzsequenzéierung direkt op klinesch Sputum-Prouwen ugewannt ka ginn.

Produktdetektiounsberäich

34Genen, déi mat Medikamentenresistenz verbonne sinn,18Antituberkulos Medikamenter a6NTM-Drogen goufen entdeckt, déi ofdecken297Medikamentenresistenzplazen; Zéng Aarte vu Mycobacterium tuberculosis a méi wéi190Aarte vun NTM goufen entdeckt.

Tabelle 1: Informatiounen iwwer 18+6 Medikamenter +190+NTM

Produktvirdeel

Staark klinesch Adaptabilitéit: d'Sputumprouwen kënnen direkt mat engem Selbstverflëssegungsmëttel ouni Kultur nogewise ginn.

Den experimentellen Operatiounsprozess ass einfach: déi éischt Ronn vun der Amplifikatiounsoperatioun ass einfach, an de Bau vun der Bibliothéik ass an 3 Stonnen ofgeschloss, wat d'Aarbechtseffizienz verbessert.

Ëmfangräich Typiséierung a Medikamentenresistenz: Ofdeckung vun den Typiséierungs- a Medikamentenresistenzplazen vun MTB an NTM, déi déi wichtegst Punkte vu klinescher Suerg sinn, korrekt Typiséierung an Detektioun vu Medikamentenresistenz, Ënnerstëtzung vun onofhängeger Analysesoftware a Generéierung vun Analyseberichter mat engem Klick.

Kompatibilitéit: Produktkompatibilitéit, Upassung un déi üblech ILM- a MGI/ONT-Plattformen.

Produktspezifikatioun

Produktcode Produktnumm Detektiounsplattform Spezifikatiounen
HWTS-NGS-T001 Mycobacterium-Typing- a Medikamentenresistenzdetektiounskit (Multiplex-Amplifikatiounsmethod) ONT, Illumina, MGI, Salus pro 16/96rxn

Zäitpunkt vun der Verëffentlechung: 23. Januar 2024